高效液相色譜法是20世紀70年代急劇發(fā)展起來(lái)的一項高效、快速的分離、分析技術(shù)。液相色譜法是指流動(dòng)相為液相的色譜技術(shù),在經(jīng)典的液相色譜法基礎上,引入氣相色譜法理論,在技術(shù)上采用高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測器,實(shí)現了分析速度快、分析效率高和操作自動(dòng)化,它具有高壓、高速、高效、高靈敏度等特點(diǎn)。
它是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑,緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的
kromasil色譜柱,經(jīng)進(jìn)樣閥注入供試品,由流動(dòng)相帶入柱內,在柱內各成分被分離后依次進(jìn)入檢測器,色譜信號由記錄儀、積分儀或色譜工作站記錄。
做好以下幾點(diǎn),更好的使用kromasil色譜柱:
1、拿到色譜柱后先閱讀說(shuō)明書(shū),了解色譜柱的具體性能:耐受溫度、耐受PH等。以及色譜柱的沖洗和保存條件。經(jīng)過(guò)柱校測試確認色譜柱本身沒(méi)有問(wèn)題后方可正常使用。
2、樣品充分前處理,確保樣品的潔凈;使用保護柱或在線(xiàn)過(guò)濾器,根據實(shí)際情況更換保護柱芯或濾片。
3、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動(dòng)。
4、應逐漸改變溶劑的組成,特別是反相色譜中如果流動(dòng)相中使用了緩沖鹽,避免出現鹽析。
5、選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是PH),以避免固定相被破壞,PH過(guò)低共價(jià)鍵斷裂,鍵和相水解;PH過(guò)高硅膠溶解。
6、在使用過(guò)程中,如果壓力升高,或出現污染,選擇適當的條件沖洗或反沖。
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