飛諾美色譜柱是高效液相分離系統的中重要的環(huán)節，業(yè)內常把色譜柱比喻為液相色譜的心臟，其根據極性分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為主，反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì)。
在使用飛諾美色譜柱的過(guò)程中應當注意的問(wèn)題：
1、避免直接改變溶劑的組成
在需要改變檢測樣品溶液組成是，應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然。且在使用次洗脫能力強?洗脫液沖洗時(shí)，對流路系統中流動(dòng)相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡，每種流動(dòng)相的體積應是柱體積的20倍左右，即常規分析需要50~75ml。
2、避免壓力和溫度的急劇變化
溫度的突然變化或者使飛諾美色譜柱從高處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會(huì )沖動(dòng)柱內填料，因此在調節流速時(shí)應該緩慢進(jìn)行，以保持柱內填料的穩定性。
3、避免色譜柱反沖
一般來(lái)說(shuō)不能反沖，只有使用說(shuō)明書(shū)上標明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則，會(huì )影響是迅速降低柱效。
4、禁止樣品未經(jīng)處理直接進(jìn)入
避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內，需要對樣品進(jìn)行預處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱，保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。
5、避免流動(dòng)相使用不當而破壞固定相
選擇使用適宜的流動(dòng)相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一段預柱，分析柱是鍵合硅膠時(shí)，預柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預先被硅膠"飽和"，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
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